小鼠外周血中性粒細胞分離液試劑盒

產(chǎn)品簡介
是一種用于從小鼠外周血中分離中性粒細胞的試劑盒，其主要組成包括試劑A、試劑C、鼠紅細胞沉降液、紅細胞裂解液和細胞洗滌液等。小鼠外周血中性粒細胞分離液試劑盒

產(chǎn)品型號：P9201

更新時間：2025-10-09

廠商性質：生產(chǎn)廠家

訪問量：2801

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產(chǎn)品分類

細胞生物學

細胞周期檢測細胞轉染無血清系列細胞檢測細胞器提取試劑盒支原體檢測系列細胞培養(yǎng)與消化植物培養(yǎng) 密度梯度離心介質血小板分離系列單個核細胞分離系列淋巴細胞分離系列細胞培養(yǎng)基細胞檢測相關試劑細胞系（株）細胞凋亡/增殖與毒性/染色細胞培養(yǎng)相關試劑細胞生長因子細胞消化液其他細胞分離系列中性粒細胞分離系列白細胞分離系列血清細胞培養(yǎng)基Kit
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注意：本產(chǎn)品試劑組分和操作步驟發(fā)生變化，使用前請仔細閱讀說明書。

保存：本產(chǎn)品對光敏感，應該室溫避光儲存，保質期 2 年。無菌開封后，保存于室溫。

試劑盒組成：

試劑 A 200mL 室溫避光

試劑 C 100mL 室溫避光

紅細胞裂解液 100mL 室溫

細胞洗滌液 200mL 室溫

操作步驟一：

紅細胞沉降（僅供參考）沉降去除紅細胞：取新鮮抗凝血與血液稀釋液(注射用生理鹽水或 1XPBS)及紅細胞沉降液按照 1:1:1 比例混勻，室溫下靜置 30-40min 后，可見紅細胞沉于試管底部，小心吸取上清層(富含白細胞及血小板)用于后續(xù)細胞分離。

操作步驟二：

樣本分離（僅供參考）

1. 樣本分離：當樣本體積小于 5mL 時,先在離心管中先加入 4mL 試劑 A，后將 2mL 試劑 C 小心疊加于試劑 A 之上，形成梯度界面(樣本體積大于等于 5mL，試劑 A 與試劑 C 比例 2:1，試劑總量等于沉降后樣本含量),將懸液小心平鋪于分離液液面上方。由于密度差異，可見明顯的分層界面(注意二者的總體積不能超過離心管的三分之二，否則會影響分離效果)。

2. 室溫條件下水平轉子 600-1000g ，25-30min(血液體積越大所需離心力越大,離心時間越長,優(yōu)良分離條件需摸索，離心最大轉速不超過 1000g)。

3. 離心后，離心管中可見兩個環(huán)狀乳白色層，上層為單個核細胞層,下層即所需中性粒細胞層(受個體差異及分離條件影響，粒細胞白膜層可能會出現(xiàn)顏色較淺的情況)。

4. 用吸管吸取下層中性粒細胞白膜層至新的離心管中，加入 10mL 細胞清洗液洗滌細胞，250g，離心 10min。

5. 棄上清,加入 5mL 細胞清洗液重懸細胞,250g，離心 5min。

6. 棄上清，重懸細胞備用。

注意事項：

A.開封前顛倒混勻，本分離液為無菌產(chǎn)品，為延長分離液保存時間，請在無菌條件下啟封，避免微生物污染。

B.分離液使用時應始終保持室溫（18℃~25℃），如室內溫度較低，可將分離液預熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心，可能會導致白膜層不清晰。

C.血液樣本最好為新鮮抗凝血（采血 2h 以內），為保持中性粒細胞的活性，應避免冷凍和冷藏。

D.稀釋血液或洗滌細胞，不可使用含 Ca、Mg 離子的緩沖液及培養(yǎng)液，其成分會導致血細胞凝集，大大降低細胞得率及純度。

E.部分塑料制品（如聚苯乙烯）因其帶有的靜電作用，可能會導致細胞掛壁，影響分離效果。

F.血液樣本的粘稠度或者是溫度差異，可能會影響分離效果，可以調節(jié)離心轉數(shù)和離心時間，摸索優(yōu)良的分離條件。

G.如果要進一步對分離的細胞進行培養(yǎng)，注意全程保持無菌操作，避免微生物污染。

H.不同動物血液在不同比重分離液中的細胞離散系數(shù)及細胞帶電不同，用戶在制定分離液時應提供所需分離液的比重、動物種屬及被分離細胞的名稱。

參考文獻